雞禽流感抗體檢測(cè)試劑盒用于評(píng)估養(yǎng)雞場(chǎng)雞禽流感疫苗免疫狀況及感染雞的血清學(xué)輔助診斷。本試劑盒采用間接ELISA法，在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被禽流感抗原。在試驗(yàn)中，加入稀釋后的待檢血清，經(jīng)過溫育后，若樣品中含有禽流感特異性抗體，則與包被板上的抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后；加入酶標(biāo)二抗，與檢測(cè)板上的抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物；在微孔中加入TMB底物液，經(jīng)酶催化形成藍(lán)色產(chǎn)物，加入終止液終止反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀450nm波長測(cè)定反應(yīng)孔中的吸光度A值。
雞禽流感抗體檢測(cè)試劑盒的操作步驟：
1.取預(yù)包被的檢測(cè)板（根據(jù)樣品多少，可拆開分次使用），將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測(cè)板孔中。同時(shí)設(shè)陰性、陽性及空白對(duì)照各1孔，取陰性及陽性對(duì)照各100μl分別加入反應(yīng)孔中，空白對(duì)照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）。
2.蓋上封板膜，置37℃溫育30分鐘。
3.小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔（約350μl），靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。
4.每孔加酶結(jié)合物100μl，蓋上封板膜，置37℃溫育30分鐘。
5.小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗滌3次,方法同2。切記在干凈吸水紙上拍干。
6.每孔先加底物A液50µl、再加底物B液50µl，混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。
7.每孔加終止液50μl，使反應(yīng)終止，10分鐘內(nèi)測(cè)定結(jié)果。
雞禽流感抗體檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng)：
1.試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫，使用前應(yīng)搖勻，使用后放回2～8℃。
2.不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用，使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。
3.底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性，使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。
4.TMB（底物B液）不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。
5.檢測(cè)板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中，并盡快置于2～8℃)。
6.所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。
7.嚴(yán)格遵守操作說明可以獲得的結(jié)果。操作過程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過程必須。
8.血清稀釋板為一次性用品，不得重復(fù)使用；血清稀釋板的較大容量為300μl/孔。
