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包涵體蛋白溶解液說明書

InclusionbodyDenatureReagent

Cat.No.  K0007   

保存：2 - 8 ℃       

組分說明

                                             Cat.No.      K0007A

                                             Volume       100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      包涵體是重組蛋白因?yàn)檫^度表達(dá)、蛋白無足夠時(shí)間進(jìn)行肽鏈折疊，部分折疊中間態(tài)之間的特異性錯(cuò)誤聚合形成的一種不溶性結(jié)構(gòu)。這些基因表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列雖然正確，而其立體結(jié)構(gòu)是錯(cuò)誤的，因此一般沒有生物活性。包涵體一般含有50%以上的重組蛋白，其余為外源蛋白、核糖體元件、RNA 聚合酶、內(nèi)毒素、外膜蛋白 mpC、ompF 和ompA 等、核酸（環(huán)狀或缺口的質(zhì)粒DNA），以及脂體、脂多糖等，無定形，呈非水溶性，只溶于變性劑如尿素、鹽酸胍等。使用本產(chǎn)品提取包涵體蛋白，可增加包涵體蛋白的溶解性，提高包涵體蛋白的提取效率，變性劑可通過透析去除。

注意事項(xiàng)

 1.  本試劑含有變性劑，操作時(shí)請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。

 2.  在低于4℃的保存溫度下易出現(xiàn)絮狀沉淀，使用時(shí)恢復(fù)至室溫，絮狀沉淀溶解后即可進(jìn)行后續(xù)步驟。

操作步驟 

 1. 用細(xì)菌裂解液或其他方法裂解菌液后提純包涵體。

 2. 1g 包涵體濕重中加入8ml 包涵體蛋白溶解液（粗略估算包涵體濕重）。

 3. 加入溶解液后混勻，振搖孵育 30 分鐘。

 4. 離心去除細(xì)胞碎片。

 5. 收集上清液，進(jìn)行后續(xù)步驟測(cè)試。

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